一种重组自分泌运动因子的表达方法，目的是保持较高活性，高水平表达均一性糖基化修饰；本发明通过构建pInsulator4x‑ATXβ‑8His‑DHFR重组表达载体，利用CAG启动子和双顺反子IRES共表达ATX和DHFR基因，引入绝缘子insulator（4X）避免了基因之间的相互影响，通过MTX阶梯式梯度加压筛选大大增加了ATX在HEK293宿主细胞中的重组表达水平；通过控制重组细胞株的接种量、补料方式、培养温度和转速、谷氨酰胺和葡萄糖含量监测及pH值控制，使重组蛋白获得了较为均一性的糖基化修饰，最终ATX蛋白获得12mg/L的高收率，且保持较高的lysoPLD和PDE活性。
