本发明提供一种检测糖尿病肾病生物标志物的胶体金试剂盒及方法,该胶体金试剂盒包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和支撑垫。硝酸纤维素膜依次设置第一检测试剂条、第二检测试剂条、第三检测试剂条、第四检测试剂条和捕获试剂条。第一检测试剂条包被抗Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体,第二检测试剂条包被抗足糖萼蛋白单克隆抗体,第三检测试剂条包被抗中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体,第四检测试剂条包被抗肝型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体;捕获试剂条包被与金标垫上包被的单克隆抗体结合的二抗。本发明所述胶体金试剂盒实现同时定量检测早期糖尿病肾病的多种生物标志物,节省检测早期糖尿病肾病的成本,提高检测效率。