本发明涉及微生物发酵领域,公开了一种发酵制备乳酸的方法,其特征在于,该方法包括:将乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)接种到发酵培养基中,接种后往发酵体系中通入微量含氧气体进行预发酵,直至发酵体系中乳酸片球菌的含量达到OD600=8‑13;然后停止通入含氧气体,继续发酵至发酵体系中的五碳糖消耗量达到45‑55重量%;其中,接种前所述发酵培养基中含有40‑100g/L的葡萄糖和15‑45g/L的五碳糖,所述含氧气体的通气量以氧气计为0.005‑0.05vvm。采用本发明提供的方法进行乳酸发酵,可以将目前具有巨大产能的纤维素原料加以利用,为实现乳酸发酵的低成本、高转化率的规模工业化生产提供参考。