本发明涉及一种利用Runx2和小分子化合物诱导人成纤维细胞重编程成骨细胞的方法,特别是一种利用Runx2基因表达及小分子化合物CHIR99021和/或小分子化合物forskolin,在地塞米松存在的条件下诱导人成纤维细胞转分化为成骨细胞的方法,属细胞生物学与组织工程领域。它包括:构建携带Runx2‑GFP的慢病毒浸染人皮肤成纤维细胞,之后利用小分子化合物5~10μMCHIR99021和10μMforskolin在地塞米松的存在的条件下,进行人成纤维细胞的转分化,7~15天以后,更换成骨细胞诱导液进行诱导,5~20天后可将其诱导为成骨细胞的方法。本发明可以简单快速地获得成骨细胞,用于骨代谢性疾病,骨折等的细胞治疗。本发明的药物组合也可用于组织工程骨的研发和生产。为基础研究带来便捷,为临床应用带来前景。