本发明公开了一种3D培养自体脂肪MSCs来源的神经前体细胞的方法，包括如下步骤：S1.制备胶原3D支架；S2.采集脂肪组织，分离脂肪细胞，以MSCs培养基培养收获P0代MSCs，P0代MSCs以MSCs培养基重悬，培养收获P1代MSCs；S3.预处理胶原3D支架；S4.以MSCs培养基重悬P1代MSCs，接种至含胶原3D支架的组织培养皿中，使用NPCs培养基继续培养6天，收获NPCs。本发明的有益效果：通过采用层黏连蛋白和玻连蛋白包被胶原海绵构建胶原3D支架，能促进MSCs粘附，抑制其神经元分化。然后以MSCs培养基预处理胶原3D支架，防止MSCs粘附过程中成团，最大程度保证单细胞粘附。采集腹部脂肪分离、扩增MSCs，采用胶原3D支架培养NPCs，能获得的NPCs，能够满足自体脂肪MSCs来源NPCs的纯度和制备需求。
