本发明公开了一种软骨细胞体外端粒延长增殖培养的方法及人源组织工程化再生软骨。通过在体外对软骨细胞进行端粒酶mRNA转染,使后续培养得到的软骨细胞中端粒延长,并且在端粒酶mRNA的转染与完全培养基中维生素C、B18R或p65i、雷帕霉素和白藜芦醇等小分子化合物的协同作用下,可以显著提高软骨细胞尤其是老龄患者的软骨细胞的增殖与活力,对于改善或治疗衰老引起的细胞功能衰退,使其实际应用于再生医学治疗,具有重大意义。上述软骨细胞体外端粒延长增殖培养的方法使得软骨细胞端粒的延长不是连续的甚至频繁的,无基因组插入诱变风险,也无细胞永生化成瘤风险,在安全性和应用性上有了大大的提高,使之在再生医学治疗上有更好的应用。