本发明公开了一种交联血红蛋白的制备方法,其包括如下步骤:a、稀释脱氧血红蛋白,加入到无氧反应器中;b、无氧反应器顶部设置雾化器,交联剂通过所述雾化器加入反应器中,发生交联反应;c、加入还原剂终止交联反应,用超滤换液的方式除去未反应的交联剂和终止还原剂,得到交联血红蛋白。本发明制得的交联血红蛋白含有较低含量的大分子(大于500kD)和小分子(小于64KD),加入到器官灌注液中能够解决现行灌注液因缺少携氧剂而引起器官的酸中毒和溶酶体酶激活不良后果及再灌注时产生过量的自由基损伤细胞的现象,其制备、储存、运输及使用均十分简单方便。