本发明提供了一种塞来昔布有关杂质的检测方法及其应用，该检测方法采用反相高效液相色谱法，其色谱条件如下：色谱柱：C30硅烷键合全多孔硅胶色谱柱；流动相组成：A:(水相)：B(乙腈)；C(甲醇)；梯度洗脱；流动相流速：0.5‑1.5ml/min；检测波长：210‑280nm；柱温：20‑40℃；检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器。本发明提供了一种新的高灵敏度的方法，不仅可以分离检测塞来昔布的3个同分异构体，而且同时能够分离检测杂质D、杂质F和杂质G，对他们进行质量进行监控，方法准确度高，灵敏度高，而且分离度好。
