本发明公开了一种高纯度甘油葡萄糖苷及其制备方法,涉及甘油葡萄糖苷的制备,解决了达到成本低廉、制程简化、且可应用于工业量产的问题,其技术方案要点是:(1)提供反应液,反应液为低纯度甘油葡萄糖苷混合物,低纯度甘油葡萄糖苷混合物为甘油葡萄糖苷、一位甘油葡萄糖苷、甘油、葡萄糖以及果糖按照不同比例的任意组合所组成的群组,其中甘油葡萄糖苷、一位甘油葡萄糖苷、甘油、葡萄糖以及果糖的浓度质量分数分别为10‑35%、2‑3%、6.7‑16.8%、20‑35%、15‑25%;(2)将酵母菌加入反应液中进行发酵反应后制得高纯度甘油葡萄糖苷。