本发明提供了一种发酵生产丙酸的方法，以富含乳酸的发酵废液为丙酸发酵培养基，通过固定化装置、发酵罐和膜分离系统相结合的方法，实现半连续式二次发酵生产丙酸，具体包括以下步骤：（1）获得第一次发酵废液作为丙酸发酵培养基；（2）将产丙酸菌液固定化；（3）发酵环节；（4）发酵液膜分离系统过滤；（5）发酵‑过滤循环交替。本发明一方面变废为宝极大地节省了废液处理成本和原料成本；另一方面，经优化的半连续式发酵工艺契合了工业化生产的需求，从原来7至10天一个批次的发酵培养周期缩短至平均60h左右，膜分离系统总和处理量达到148L/min及以上，提高了丙酸的生产效率。
